基因擴增（PCR）實驗室設計方案
臨床基因擴(kuo)增實驗又稱PCR實(shi)驗，是專門用(yong)來(lai)檢驗艾滋病(bing)、乙型肝炎、禽疫(yi)病(bing)等病(bing)毒感(gan)染性疾(ji)病(bing)的一種(zhong)檢測手段。它可以通(tong)過(guo)將病(bing)毒體內(nei)所(suo)含的基因(yin)進行擴增(zeng)的方法，測出一些病毒含量不高的感染(ran)者(zhe)體內是否(fou)含有特定(ding)的病毒。由于該(gai)檢(jian)測(ce)方法(fa)可(ke)以測(ce)出普(pu)通檢驗(yan)難以檢測出的病(bing)毒并具有靈敏度高、特(te)異(yi)性高、快(kuai)捷、對樣品(pin)要(yao)求低等優點，因此被臨床醫(yi)生廣(guang)為認可(ke)，已廣(guang)泛應用(yong)于(yu)醫(yi)院的臨床診(zhen)斷和各防(fang)疫檢測(ce)部門的禽疫病診(zhen)斷。
【基(ji)因(yin)擴(kuo)增實驗室（PCR）概述】
近(jin)年來(lai)對臨床基因(yin)擴增檢驗實驗室的(de)建設越(yue)來(lai)越(yue)得(de)到重視(shi)，因(yin)為它對檢測結(jie)果(guo)的(de)可靠性(xing)、準確性(xing)和安全性(xing)起到至(zhi)關重要的(de)作(zuo)用。本(ben)文主要從臨床基因擴增檢驗(yan)實驗(yan)室的(de)平面布(bu)局(ju)，空調(diao)通風(feng)系(xi)統設計、氣流控制和污染的(de)防(fang)制幾個方面(mian)對實(shi)驗(yan)室(shi)設計中(zhong)的主要特(te)點進行了闡(chan)述。臨(lin)床基(ji)因擴(kuo)增(zeng)檢驗(yan)實(shi)驗(yan)室(shi)設計的核心問(wen)題是(shi)如何(he)避(bi)免污染(ran)。因此，實驗(yan)室(shi)設計依據、實驗(yan)室(shi)的平面布(bu)局、實驗(yan)室(shi)裝飾材(cai)料的選擇(ze)、空調通風系統設計、氣流控制等都是(shi)圍繞(rao)這個核心(xin)問題進(jin)(jin)行的(de)。下面(mian)就(jiu)對這幾個方面(mian)分(fen)別進(jin)(jin)說明。
【基因擴(kuo)增實(shi)驗(yan)室（PCR）設計依據(ju)】
《醫(yi)療機(ji)構臨床基(ji)因(yin)擴增管(guan)理辦(ban)法》
《生(sheng)物(wu)安(an)全實驗室建筑技術規范》
GB50346-2004 《潔凈廠房設(she)計(ji)規(gui)范》
GB50073-2001 《高效空氣過濾(lv)器》
GB13554-92 《實驗室生物安全通(tong)用要求》
GB1989-2004 《微生(sheng)物和(he)生(sheng)物醫學(xue)實驗室生(sheng)物安全通用準則(ze)》WS233-2002
【實驗(yan)室布局設計】
臨(lin)床基因(yin)擴增檢(jian)驗實(shi)驗室原(yuan)則上(shang)分為四個單獨的工作區域(yu)：試劑貯存和準備(bei)區、標本制備(bei)區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析(xi)區。為避免交叉污染，進入各個(ge)工作區域(yu)必須嚴格遵循單(dan)一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區(qu)→標(biao)本制備區(qu)→擴(kuo)增(zeng)反應混合物(wu)配制和擴(kuo)增(zeng)區→擴增產物分析(xi)區(qu)。各實(shi)驗區(qu)之間的試劑及樣品傳遞(di)應通過傳遞(di)窗進行。
【實(shi)驗(yan)室裝飾(shi)材料】
實驗室(shi)設計為全(quan)封閉空間(jian)，空間(jian)四周及上(shang)層均(jun)為50mm厚手(shou)工彩鋼(gang)板結(jie)構，填充物為(wei)阻燃材(cai)料，主(zhu)體顏色為(wei)啞白色，門窗玻璃為(wei)50mm厚雙層中空鋼(gang)化玻璃嵌入手工彩(cai)鋼(gang)板(ban)卡槽內(nei)，如采用機制彩(cai)鋼(gang)板(ban)為防止沉積灰塵，窗料(liao)使(shi)用R25MM鋁合(he)金圓弧壓線。
所有二維連接處的內側均使用R50MM鋁合(he)金(jin)內圓角，暴露(lu)在外的(de)二維連接(jie)線的(de)外側則用R100MM鋁(lv)合(he)金外角連接;彩鋼板的三(san)維(wei)連(lian)接(jie)處使用三(san)維(wei)接(jie)點過度，而彩鋼板與墻角(jiao)地面則用鋁合金(jin)槽連(lian)接(jie)。
吊頂材(cai)料(liao)(liao)亦為彩(cai)鋼板，地(di)面為環(huan)氧樹脂材(cai)料(liao)(liao)，具有無縫隙、耐腐蝕(shi)、平整、容易清洗(xi)的特(te)征。地(di)面地(di)腳線用(yong)陰角鋁材(cai)裝飾(shi)，美觀且(qie)嚴(yan)密性(xing)好(hao)。整個實驗室內應形(xing)成堅固、無縫、平滑、美觀、不反(fan)光、不積塵、不生銹、防潮(chao)、抗(kang)菌、性能(neng)優良的無菌表面和(he)內殼。基(ji)因檢測(ce)實驗室入口設置有門禁和(he)實時攝像頭，可有效(xiao)控(kong)制非(fei)授權人(ren)員的進入。
【通風壓力控(kong)制(zhi)】
基因擴增（PCR）實驗(yan)室并沒有嚴格的凈化要(yao)求，但是(shi)為(wei)避免各個實驗(yan)區域間交(jiao)叉污染的可能性，宜采用全送全(quan)排(pai)的(de)氣流組織形式。同時，要嚴格(ge)控制送、排(pai)風的(de)比例以保證各實驗(yan)區的(de)壓力要求。
（一）試(shi)劑貯存和(he)準備區該(gai)實(shi)驗(yan)區(qu)主要進行的(de)操(cao)作為貯存試(shi)劑的(de)制備(bei)、試(shi)劑的(de)分裝和主反應混合液(ye)的(de)制備(bei)。試(shi)劑和用于標本制作的(de)材料(liao)應直接運送至該(gai)區，不得經過其(qi)他區域(yu)。試劑原材料(liao)必須(xu)貯存(cun)在本區內，并(bing)在本區內制備成所需的貯存(cun)試劑。對與(yu)氣流壓力的控(kong)制，本區并沒(mei)有(you)嚴格的要求。
（二）標(biao)本制備區該區(qu)域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA）提(ti)取、貯(zhu)存(cun)及其加入(ru)至(zhi)擴增反應(ying)管(guan)和測定RNA時cDNA的(de)合成。本區(qu)的(de)壓力梯度(du)要求為：相(xiang)對(dui)于鄰近區(qu)域為正壓，以避免從鄰近區(qu)進入(ru)本區(qu)的(de)氣溶膠污染。另外，由于在(zai)加樣操(cao)作(zuo)中可(ke)能會發(fa)生氣溶膠所致的污染，所以應(ying)避免在(zai)本區內不(bu)必(bi)要的走動。